梅里埃酵母菌鉴定卡相关药敏试验方法介绍

　　梅里埃酵母菌鉴定卡在实验室中很常见，酵母菌作为一类重要的真菌，被广泛应用于人类的生产活动中。微基生物专注微生物多样性研究，为高校、医院、研究所等单位提供科研服务。不仅可以检测土壤、水体、粪便、肠道内容物等样本中混合微生物的种类及丰度，而且还可以提供细菌、真菌等纯菌的菌种鉴定服务。

 

　　梅里埃酵母菌鉴定卡菌种鉴定一般是提取纯菌A的基因组DNA，然后PCR扩增16srDNA片段，之后通过一代测序或三代测序检测16SrDNA的全长，与国际上的数据库进行比对，默认选取比对结果中相似性高的物种分类信息，之后构建系统发育树，然后得出样本A与XX物种的相似性高。

 

　　操作规程：

 

　　1、取血平板上的单个菌落制片，做革兰氏染色镜检证实为真菌。

 

　　2、从冰箱取出鉴定卡（YBC），待恢复至室温后取出编号，放到卡片架上。

 

　　3、浊度计校零及100％，用装有结晶紫的试管调零，用0.45％的盐水管调100％。

 

　　4、挑取经纯化的单个菌落，用浓度为0.45％盐水，配制成2麦氏单位浓度的菌悬液。

 

　　5、放入填充箱内填充，待填充完成后用塞子封口，检查和排除气。

 

　　6、把卡片放在30℃的孵箱内孵育18～24小时，然后放入阅读箱内，仪器自动读卡。

 

　　7、同时做手工药敏试验：有2种方法：

 

　　8、配制0.5麦氏单位浊度该菌液，用棉签均匀涂于念珠菌药敏平板上，待5min后贴相应药敏纸片，35℃培养24～48小时，读取低抑菌浓度（MIC）并报告。

 

　　9、用0.9％生理盐水配制0.5麦氏单位浊度该菌液，再用0.9％生理盐水1﹕1稀释，吸取0.5ml菌悬液到念球菌药敏平板，用棉签均匀涂布，弃去多余的菌悬液，放置5分钟后贴药片，35℃培养18～24h，测量抑菌环直径并报告。