革兰氏阴性细菌鉴定卡GN

梅里埃革兰氏阴性细菌鉴定卡GN说明书：

【产品名称】

通用名称：革兰氏阴性细菌鉴定卡

英文名称：VITEK 2 Gram-Negative Identification Card (VITEK 2 GN Test Kit)

【包装规格】

20 测试/盒

【预期用途】

该产品用于自动鉴定有临床意义的发酵和非发酵革兰阴性杆菌。

该产品与 VITEK® 2 系统 一起使用用于自动鉴定大多数有临床意义的发酵和非发酵革兰阴性杆菌。革兰氏阴性细菌鉴定卡（以下简称 GN 卡）仅供一次性使用，该卡能鉴定的细菌见附表 1：GN 卡鉴定的细菌。

【检验原理】

GN 卡根据已有的生化方法 1,2,4,8-9,10,11,12,17,18,20,21,24,25,27，和新研发的底物来检测碳源的利用、酶活性和耐

药性。卡片上有 47 个生化试验，一个阴性对照孔。脱羧酶阴性对照孔（52 号孔）用来作为脱羧酶试验的基础值参考。最终结果可于 10 小时内获得。

【主要组成成份】

详见附表 2：GN 反应孔内容物。

注：表中未注明的编号在 1 和 64 之间的其它反应孔为空白。

【储存条件及有效期】

在 2℃～8℃的条件下封闭储存于原包装盒内。有效期 12 个月。

生产日期：详见外包盒标签。

有效期至：详见外包盒标签。

【适用仪器】

全自动微生物鉴定及药敏分析仪（VITEK 2 System）型号：VITEK 2， VITEK 2 XL

全自动微生物鉴定及药敏分析系统（VITEK 2 Compact System）型号：VITEK 2 Compact

GN 卡与 VITEK 2 仪器配合使用，可作为日常常见的发酵和非发酵革兰阴性菌鉴定的完整系统，所需

材料如下：

 VITEK® 2 GN 卡

 VITEK® 2 DENSICHEK 电子比浊仪或 VITEK® 2 DENSICHEK 常见套件

 DensiCHEK Plus Standards Kit 电子比浊仪标准浊度管或 DENSICHEK 管 K 标准套件

 VITEK® 2 卡架

 样本稀释液（0.45%～0.50%NaCl, pH4.5～7.0）

 12mm×75mm 清洁一次性塑料管（聚苯乙烯）

 无菌棒或拭子

 合适的琼脂培养基（参见附表 3：培养要求表）

可选配件：

 容积可调式盐水分配器

 接种环

 预装样本稀释液的试管（0.45% 至 0.50% NaCI 溶液，pH 4.5 至 7.0）

 试管盖

 涡旋震荡器

【样本要求】

欲详细了解样本准备信息，请参见附表 3：培养要求表。

革兰氏阴性细菌鉴定卡GN检验方法：

警告：未遵守本部分有关执行实验室任务的说明和建议，可能会导致结果错误或延迟。欲详细了解产品具体信息，请参见培养要求表。

见适用仪器使用手册。

注：按标准的实验室规程用纯培养物制备接种物，如果是混合培养物，需重新进行分纯。建议使用菌纯度确认平板，以确保用于试验的是纯培养物。

1） 完成以下某项操作：

• 如果符合培养要求，从原代培养板上选择分离的菌落。

• 将要测试的细菌转移至适当的琼脂培养基上传代培养和相应孵育。

2） 以无菌方法，将 3.0mL 无菌盐水（0.45%至 0.50%NaCl 溶液，pH 4.5 至 7.0）加入一个透明的塑料（聚苯乙烯）试管（12 mm x 75 mm）中。

3） 用无菌棒或拭子向在第 2 步中准备的盐水试管挑取足量形态类似的菌落。用经过校准的 VITEK® 2 DensiCHEK™ Plus 或 VITEK® 2 DensiCHEK™按相当于 McFarland No. 0.50 至 0.63 的浊度准备均质菌悬液。

注：配置好的菌悬液在接种试卡前，放置不能超过 30 分钟。

4） 将菌悬液试管和 GN 卡放入卡架中。

5） 参阅适当的仪器使用手册，了解数据输入说明和如何向仪器中装载卡架。

6） 丢弃危险性废物时请遵循所在地监管机构的指南。

质量控制

质控株与其期望结果列于 VITEK 2 GN 质控表中，根据本文件中规定的试验菌株操作质量控制。

认证声明

兹此证明, bioMerieux 符合 ISO 13485 和 FDA 质量体系规范（QSR）关于微生物鉴定系统设计、开发和制造的要求。

试验频率

目前，建议遵循监管机构有关鉴定产品试验频率指南。

通常做法是，在收到试剂盒时实施 QC。反应必须符合使用说明结果。

如果结果不符合这些标准，可以传代培养分纯，重复试验。如果结果仍然不符合标准，采用其它鉴定方法，并联系 bioMerieux。

质控菌试验和储存

 依厂商说明复溶菌株；

 采用含 5%羊血的大豆琼脂 (TSAB)。在需氧条件下以 35℃至 37℃温度孵育约 18 至 24 小时；

 检查纯度。实施第二次传代培养，以便试验。

 采用含 5%羊血的大豆琼脂 (TSAB)。在需氧条件下以 35℃至 37℃温度孵育约 18 至 24 小时

储存条件

短期保存条件

1） 以划线方式接种至 TSAB 平板或斜面上；35℃～37℃孵育 24 小时；

2） 2℃～8℃冷藏至多 2 周；

3） 按上述要求传代培养一次，以便用于质量控制。

长期保存条件

1） 用含 15% 甘油的大豆肉汤(TSB)配制浓菌悬液；

2） - 70℃冷冻保存；

3） 实施质量控制之前，用 TSAB 实施两次传代培养。

注：避免反复冻融，把冷冻保存菌株分装为单份使用或用无菌棒从冷冻保存的菌中取出少部分使用。

精简质量控制

注：只限工业使用的实验室应该遵循精简质量控制部分中的内容实施质量控制。这些用户无需额外试

验。

因为不含容易在运输条件下降解的底物，可以通过试验两个菌株实施精简质量控制：在 GN上，一个在大多数情况是阳性，另外一个在大多数情况是阴性。请参见 GN 质量控制表。

全面质量控制

不符合精简质量控制测试要求的客户，需要实施全面质量控制试验，以便证明针对某鉴定产品的每种底物的阳性和阴性反应。

欲在开始就符合精简质量控制测试要求，CLSI® M50-A 标准要求用户实施和记录以下两项中的一项：5

•完成验证试验，以证明其性能符合制造商声称的性能。

•实施全面质量控制测试，应该在至少三个不同季节至少对三批产品实施。

请参阅完整的 CLSI® M50-A 标准，了解如何保持符合要求，以及精简质量控制测试对于用户和制造商双方的要求和责任。

GN 质量控制表

Enterobacter hormaechei 霍氏肠杆菌 ATCC® 700323™（用于精简或全面质量控制)

Stenotrophomonas maltophilia 嗜麦芽窄食单胞菌 ATCC® 17666™（用于精简或全面质量控制)

Acinetobacter baumannii 鲍曼不动杆菌 ATCC® BAA-747™（用于全面质量控制)

Elizabethkingia meningoseptica 脑膜脓毒性伊丽莎白金菌 ATCC® 13253（用于全面质量控制)

Klebsiella oxytoca 产酸克雷伯菌 ATCC® 700324™（用于全面质量控制)

Ochrobactrum anthropi 人苍白杆菌 ATCC® BAA-749™（用于全面质量控制)

Proteus vulgaris 普通变形菌 ATCC® 6380™ (用于全面质量控制)

Pseudomonas aeruginosa 铜绿假单胞菌 ATCC® 9721™ (用于全面质量控制)

Pseudomonas aeruginosa 铜绿假单胞菌 ATCC® BAA-1744™ (用于全面质量控制)

注：Pseudomonas aeruginosa 铜绿假单胞菌 ATCC® BAA-1744™ 可能含有两种形态各异的菌落，但做质控时两种菌落都符合预期反应结果。

适用于 7.01 软件用户

Shigella sonnei 索氏志贺菌 ATCC®25931™（用于全面质量控制）

适用于 8.01 或以上软件版本用户

Escherichia coli 大肠埃希菌 ATCC®25922™（用于全面质量控制）

鉴定质量控制细菌时，GN 卡的结果通常是单选，或在低分辨率或相似细菌鉴定结果内。由于是根据反应性能而不是鉴定性能选择的质控菌株，因此，在所有预期质量控制反应均正确时，可能会出现不能鉴定或鉴定错误的结果。