梅里埃鉴定卡用于保存菌种

　　梅里埃鉴定卡一般是提取纯菌A的基因组DNA，然后PCR扩增16srDNA片段，之后通过一代测序或三代测序检测16SrDNA的全长，与国际上的数据库进行Blast比对，默认选取比对结果中相似性高的10位的物种分类信息，之后构建系统发育树，然后得出样本A与XX物种的相似性高。

 

　　微生物实验室成功地进行细菌菌种保存对于系统地分析流行菌株的生物学、分子生物学特征和耐药性的变迁以及对医院感染病原学调查、新药临床研究都十分重要。

 

　　把3种鉴定卡直接从－20℃移至35℃，待小孔液体*融化后，用注射器抽吸出阳性生长孔内的液体，点种于血平板或沙保弱平板，置35℃孵箱内24～48h，复苏。复苏菌落经分离培养后对菌株进行鉴定和药敏试验，以金黄色葡萄球菌，ATCC25923、大肠埃希菌，ATCC25922、绿脓假单胞菌，ATCC27853作质控。

 

　　用鉴定卡和半固体菌种培养基同时保存12株临床分离菌及3株，ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853标准菌株6个月对照，其中半固体中的菌株定时转种传代。结果两种方法保存菌株的生物学特性均一致。

 

　　菌株保存得不成功容易引起菌株的生物学特征改变，甚至是耐药质粒的丢失而改变细菌的耐药谱，某些敏感菌株与抗生素结合位点发生突变而形成耐药。

 

　　对生化卡内的细菌反复冻融5次，分离出的细菌效果是相同的，证实保存在生化卡上的菌种可进行多次复活利用，为了保证每次都能成功地复苏获得菌株，通过试验发现，生化卡上的试验小孔除阳性控制小孔外，其它糖类发酵孔内的细菌均能复活成功，其结果无差异。