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梅里埃VITEK在微量生化鉴定系统中的应用

发布时间: 2022-08-25  点击次数: 875次
  梅里埃VITEK采用传统的比色法和快速荧光法。根据不同类别细菌的理化性质不同,设计不同的测试卡,每一张卡包括多项生化反应。仪器采用光电比色法测定细菌因分解底物导致PH值改变或由于细菌生长利用底物而引起的透光度变化;其荧光法是在测试卡的小孔中加入酶底物,使其与细菌产生的酶结合生成荧光物质。
 
  细菌鉴定实验底物有几种不同类型,各个不同品牌的仪器均使用自己的测试卡和相应的试剂;以酶为基础的反应底物,包括显色底物和荧光底物;以微生物生长为基础的底物是糖类底物和化合物底物,还有混合底物。
 
  梅里埃VITEK通过与各种细菌发生氧化、降解及水解反应,产生颜色的变化或产生荧光物质,利用显色和荧光强度的变化。来鉴定细菌的菌型。仪器会自动选择底物进行分析。
 
  DNA测序进行菌种鉴定的结果比传统生化鉴定更为直接,鉴定结果也更为可靠。测序不依赖菌种本身特点,对所有菌种均可使用。对于细菌,对16SrRNA进行分析鉴定,对于真菌,对其ITS基因进行测序分析。利用特定引物PCR扩增未知菌株的16SrRNA基因或者ITS区,并进行DNA测序,与GenBank中的已知序列进行同源性比较后,判定细菌种类,将细菌划分到属或种。
 
  微量生化鉴定系统,是在传统生化试验的基础上加以改进,将原先用试管进行的系列生化反应,压缩整合到一组含有供不同生化试验用的脱水底物的小管组合的装置内。试验时将培养物制成菌悬液,分注于各个小管内,并在小管上加上矿物油。然后,用适宜的温度培养一定时间。取出观察各孔的颜色变化(少数试验须于滴加试剂后判断)。