梅里埃API细菌鉴定试剂盒使用操作方法

梅里埃API试剂盒细菌鉴定试剂盒种类如下：

（注）：每种试剂盒都需要相关配套试剂才能使用。

梅里埃API细菌鉴定试剂盒使用操作方法：

例：肠杆菌和其他非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）

【预期用途】
该产品用于肠杆菌和其它非苛养革兰氏阴性杆菌的鉴定。
该产品用于可导致腹泻、血流感染、尿路感染等的肠杆菌和其它非苛养革兰氏阴性杆菌的鉴定，临床常见样本来源有粪便、直肠拭子、尿、血等。
【检验原理】
API 20 E 试条由 20 个含干燥底物的微量小管组成。将菌悬液接种到管内，使小管内底物溶解。孵育过程中，所产生的代谢产物通过自发反应或加入附加试剂后而变色。鉴定结果可根据说明书的判读表进行读出，也可参照生化谱检索手册或鉴定软件，得到鉴定结果。
【主要组成成分】
试剂盒组成（用于 25 个敏感性测试）
- 25 个 API 20 E 试条
- 25 个孵育盒
- 25 张结果报告单
- 1 个封口夹
试剂盒组成（用于 100 个敏感性测试）
- 100 个 API 20 E 试条（4x25 试条）
- 100 个孵育盒
- 100 张结果报告单
- 1 个封口夹
试剂条成分

API 20 E 试条的成分请参阅说明书后的结果判读表。

【检验方法】
氧化酶试验：
必须按照制造商的使用说明进行氧化酶试验。由于它是最终图谱的组成部分，请将其结果记录于报告单上（第二十一个试验）。
试条的准备：
1.准备一个培养盒（盘和盖子），倒入约 5mL 蒸馏水或软化水【或其它不含添加剂或不含有能产生挥发性气体（如 Cl2, CO2,等）的化学物质的水】于盘的蜂窝小凹中，造成一个湿室。
2.在盘的长边写上菌株号(不要写在盖上，因为操作过程中很容易将盖子放到其它试条上）
3.从包装中取出试条。

4.将试条置于培养盒中。
注意：API 20 E 只能用于肠道细菌和或非苛养的革兰阴性杆菌。苛养菌由于对营养有特殊要求并且需要合适的防护措施(例如布鲁氏菌属 Brucella 和法朗西丝菌属 Francisella)，这些菌没有包括在 API 20 E 数据库中。 必须采用其它方法，来排除或确认这些菌的存在。
接种物的准备
 根据“警告及注意"一栏所列方法打开一安瓿 API 0.85% NaCl 培养基（5mL)或一安瓿 API 悬浮培养(5mL), 或用含 5mL 0.85 NaCl 盐水或不含添加剂的无菌蒸馏水。
 用吸管或 PSIpette 从分离平板上挑取单个分纯菌落至悬浮基物中。建议使用新鲜培养物（18-24小时）。 仔细研匀以达到均一的细菌悬液。
制备好的菌悬液必须立即使用。
注意：大多数弧菌（Vibrio)均嗜盐，如怀疑菌株为弧菌，请使用 0.85% NaCl (5mL)培养基。
试条的接种
 用同一根吸管，将菌悬液加入到试条的小管内。为避免在小管的基底部形成气泡，请将试条轻微向前
倾斜并把吸管或者 PSI 管紧靠小杯边缘加入菌液）：
- CIT、VP 和 GEL 小管，菌液需充满的管部和杯部。
- 其它管仅充满管部(不是杯部)。
- 在试验 ADH, LDC, ODC, H2S 和 URE 小杯内加入矿物油以形成厌氧环境。
 盖上培养盒。于 36℃±2℃孵育 18~24 小时。
【阳性判断值】
请参考本说明书后的“反应鉴定表"，表中列出了各种生化反应预期结果范围。
【检验结果的解释】
试条的判读
 孵育后，根据判读表表判读各反应结果。
 如果 3 个或 3 个以上测定（GLU 试验+或-)为阳性结果，记录所有自发反应于结果报告单上并观察需要

附加试剂的试验的结果：
- TDA 试验：加 1 滴 TDA 试剂。深褐色为阳性反应，记录于报告单上。
- IND 试验：加 1 滴 JAMES 试剂。整个反应管出现粉红色者为阳性，记录于报告单上。
- VP 试验：加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 试剂。至少等待 10 分钟，出现粉红或红色者表明为阳性结果，记录于报告单上。如浅粉红色在 10 至 12 分钟内出现，判断结果为阴性。
注意：吲哚产生试验必须最后进行，因为该反应释放的气体产物会千扰试条的其他试验。在加入附加试剂后，请小心勿调换培养盒盖。
 如果加入附加试剂前阳性结果（包括 GLU 试验）的数量少于 3 个：
- 重新培养 24 小时（土 2 小时），且不要加任何试剂。
- 重新进行需要加入附加试剂的试验（如前说明）。
- 为了完成鉴定，可能需要进行补充试验（参考有关鉴定的段落）。