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梅里埃 API20NE非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒说明书

发布时间: 2021-12-10  点击次数: 1329次

非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法)说明书 

产品名称通用名称:非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法) 

英文名称:API 20 NE 

包装规格25 测试/盒 

预期用途该产品用于非苛养、非肠道革兰阴性杆菌的鉴定。 该产品用于鉴定非苛养、非肠道革兰阴性杆菌(如假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属、弧菌属 和气单胞菌属等)的标准鉴定系统,包括 8 个常规试验、12 个同化试验和 1 个数据库。 

检验原理 API 20 NE 试剂条由装有脱水底物的 20 个微型管构成。常规试验接种重溶培养基的盐水细菌悬液。在 培养过程中,代谢产生颜色变化,此变化可为自发或通过加入试剂显示。同化试验接种培养基,如果它 们能够使用相应的底物,则细菌生长。依照读数表读取反应,通过参考分析曲线指标或使用鉴别软件得到鉴 别。

主要组成成分试剂盒组成(25 种实验) - 25 API 20 NE 试剂条 - 25 个孵育盒 - 25 安瓿 API AUX 培养基 - 25 张结果单 试剂条成分 在本说明书的判读表中,给出了 API 20 NE 试剂条的组成。

需要但没有提供的试剂和材料 试剂 - API NaCl 0.85 %培养基, 2 mL (Ref. 20 070) - 试剂 JAMES (Ref. 70 542) NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442)  Zn (Ref. 70 380) - 氧化酶 (Ref. 55 635*) * 参照品未在某些国家出售:采用同等试剂。 IVD非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法) 版本号 07615K - zh –2009/11 2 - 矿物油 (Ref. 70 100) 材料 - 移液管或 PSIpetter - 安瓿保护器 - 安瓿架 - 一般微生物实验室设备 

储存条件及有效期2~8℃储存,有效期为 12 个月。

生产日期:详见外包盒标签。

有效期至:详见外包盒标签。 

适用仪器- 麦氏标准比浊管 (Ref. 70 900) No. 0.5 - API 20 NE 分析鉴定系统 (Ref.20 090) apiweb™鉴定软件 (Ref.40 011) (咨询生物梅里埃

样本要求API 20 NE 不直接用于临床或其他标本。 按照标准微生物学技术,必须首先在适合的培养基(如胰蛋白酶解酪蛋白)上分离要鉴定的微生物。 

检验方法氧化酶试验 必须按照生产商的使用说明,进行氧化酶试验。应当在结果单上记录结果,因为它是最后图谱的一个有 机部分(第 21 个鉴定试验)。

菌落 API 20 NE 只应用于不属于肠杆菌科的非苛养革兰阴性杆菌。 1:有些非肠道的革兰阴性杆菌亦为氧化酶阴性(嗜麦芽黄单胞菌、不动杆菌)。这些微生物也可以 API 20 NE 鉴定,但必须根据其它细菌学或临床标准加以选择。 2:对营养要求多或需要适当处理注意事项的苛养微生物(如布鲁氏菌和弗朗西丝氏菌),未包含在 API  20 NE 的数据库内。必须采用其他方法排除或证实它们的存在。

试条的准备 准备一个培养盒、盘和盖子,向盘的底部倒入约 5mL 蒸馏水或去离子水【或任何不含添加剂或可能释放 气体(如氯气、二氧化碳等)的化学物的水】,创造一种湿气。在盘的边缘部分记录标本编号。(不要在盖上 记录编号,因为在操作期间它可能错位。)从各个包装中取出试剂条。将试剂条放入培养盒中。

接种物的准备 

按照本产品说明书警告和注意事项"段落所示,打开一安瓿 API NaCI 0.85 %培养基(2 mL),或使 用含 2 mL 不含添加剂的 0.85 %生理盐溶液。

使用吸管或滴管,通过抽吸或通过连续接触,从琼脂糖培养基上挑取 1 - 4 个形态相同的克隆。建议 使用早期培养物(18 - 24 小时)。

配制混悬液至浊度等于 0.5 McFarland。此混悬液在配制后必须立即使用。 注:调整接种物密度至 0.5 McFarland 非常重要;否则 API 20 NE 试剂条试验可能不能正确发挥功能。 特别是,较弱的接种物可能导致假阴性结果。在操作试剂条的过程中,不要接触反应杯,接种后不要将试剂 条长时间暴露空气。 

试条的接种非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法) 版本号 07615K - zh –2009/11 3

用同一根吸管将盐水混悬液加到试验管(不是反应杯),接种试验 NO3PNPG。将试剂条稍前倾,将吸 管或滴管的顶部靠在杯的侧面,以避免管的底部形成气泡。 

按照警告和注意事项"中所示,打开 1 API AUX 培养基安瓿,向安瓿加入约 200  L 剩余的盐混悬液。 用吸管混匀,避免形成气泡。

用混悬液注满由 GLU PAC 试验管和杯。当心液面必是平的或稍凸,不能呈凹或新月形。杯子装得不 满或过满可能给出不正确的结果。

3 个下划线试验(GLUADH URE)的杯子加矿物油,直至形成凸出的新月形。

盖上培养盒,在 29°C ± 2°C 培养 24 小时(± 2 小时)。 阳性判断值对于不同生化反应预期结果的范围,查阅本说明书末尾的鉴别表。 检验结果的解释读取试剂条

孵育期后,通过参阅判读表,判读试剂条。 

在结果单上记录所有自发反应(GLUADHUREESCGEL PNPG)。

为保护同化反应免受空气播散的污染,应当进行两个试验 NO3 TRP 的判读。要做这一点,在 NO3 TRP 试验判读期间,用培养盒盖子遮盖同化反应。 

NO3试验: - 各加一滴 NIT1 NIT2 试剂至 NO3杯。 - 5 分钟后,红色表示阳性反应,记录在报告单上。 - 由于氮气的产生(表现为存在小气泡)有可能引起阴性反应:加 2~3 mg Zn 试剂到 NO3杯中。 - 5 分钟后,保持无色的杯子表明阳性反应,记录在报告单上。如果杯子变为粉红色,反应为阴性,因为管 中存在硝酸盐,被锌还原为亚硝酸盐。 用于细菌鉴定的反应是硝酸盐还原。当上述二个反应(产生 NO2N2)中的任何一个为阳性时,硝酸盐 还原反应为阳性。 但是,N2的产生则可单独用作补充试验(参阅分析图谱索引)。 

检测: 1 JAMES 试剂。立即发生反应:全杯出现粉红色表明阳性结果,记录在结果单上。

同化试验:观察细菌生长。不透明杯子表明阳性反应。 偶尔,1 个杯子显示为弱生长。在这种情况,通过与试剂条上的其他试验强度比较,结果应当记录为 或 ±。 

注意: 一旦进行了上述判读,如解释"段落中所示,鉴定是可能的。在下列情况,必须重新孵育: - 无区别 - 无法接受或可疑的图谱; - 如果对获得的图谱标注了以下备注: 48 小时孵育前鉴定是无效的 使用习惯或滴管,通过抽吸吸走 NIT 1NIT 2 JAMES 试剂,立即用矿物油掩蔽试验 NO3TRP,以便形 成凸的新月形。在 29°C ± 2°C 重新孵育 24 小时,除了只应在 24 小时判读的前 3 个试验(NO3TRP GLU), 其余试验再读一次结果。 

说明: 采用数字谱获得鉴定。

测定使用率: 在结果表上,将结果分成 3 组,每组标记为编号 12 4。在每组内加阳性反应相应的数字,得到一个 7 位数;氧化酶反应构成第 21 个反应,如果为阳性则数值为 4。 

鉴定:非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法) 版本号 07615K - zh –2009/11 4 这采用数据库(V7.0)进行 * 棒状杆菌鉴定用编码册 - 查找图谱中的数字谱。 * 采用 apiweb™鉴定软件 - 通过键盘手动输入 7 位数的数字谱。

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